在蚓激酶制劑的研發(fā)與生產(chǎn)過程中，針對(duì)蚓激酶對(duì)溫度和pH敏感的特性，國(guó)內(nèi)某上市公司創(chuàng)新性地引入歐世盛全自動(dòng)在線紫外檢測(cè)系統(tǒng)，建立了實(shí)時(shí)在線的質(zhì)量控制方案。

01背景

地龍蚓激酶是從傳統(tǒng)中藥地龍（蚯蚓）中提取制備的蛋白水解酶制劑，其主要活性成分為具有纖溶作用的蚓激酶（Lumbrukinase），是從特種蚯蚓中提取的一組蛋白水解酶（酸性蛋白質(zhì)），分子量為 16–45 kDa。該酶制劑通過選擇性降解纖維蛋白原和纖維蛋白，發(fā)揮抗血栓、改善微循環(huán)等藥理作用。

蚓激酶對(duì)溫度和pH較為敏感，在提取和純化過程中，若溫度過高或pH值不合適，會(huì)導(dǎo)致蚓激酶活性降低甚至失活。傳統(tǒng)手動(dòng)取樣送檢成本較高，對(duì)操作人員的技術(shù)水平要求高，產(chǎn)品批次穩(wěn)定性差，人員和時(shí)間投入大。

02應(yīng)用案例

某上市公司在蚓激酶柱層析提取檢測(cè)中采用了歐世盛全自動(dòng)在線紫外檢測(cè)系統(tǒng)，紫外吸光度值變化實(shí)時(shí)在線監(jiān)測(cè)，根據(jù)工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)紫外吸光度值的要求，自動(dòng)切換不同洗脫液、提取液，實(shí)現(xiàn)蚓激酶提取過程的連續(xù)化和自動(dòng)化。

? 檢測(cè)過程

收集液首先收集到收集瓶中，通過蠕動(dòng)泵將收集瓶中的液體再輸送至原收集管道中，當(dāng)檢測(cè)到液位下限，啟動(dòng)蠕動(dòng)泵，當(dāng)液位下限檢測(cè)器檢測(cè)不到液體時(shí)，停止蠕動(dòng)泵工作（蠕動(dòng)泵流速≥出液流速）。上限液位傳感器作為報(bào)警傳感器，當(dāng)上限液位傳感器檢測(cè)到液體時(shí)，蠕動(dòng)泵流速加大1 倍，當(dāng)持續(xù)某個(gè)時(shí)間后，上限液位傳感器仍能檢測(cè)到液體，則發(fā)出報(bào)警信號(hào)，同時(shí)關(guān)閉入口及出口閥。

? 系統(tǒng)控制

系統(tǒng)包括在線紫外檢測(cè)單元、控制單元、洗脫液控制開關(guān)、提取液控制開關(guān)、取樣液控制開關(guān)、清洗開關(guān)等。通過紫外檢測(cè)單元持續(xù)獲得提取液的吸光度，進(jìn)而基于吸光度對(duì)洗脫液控制開關(guān)進(jìn)行控制，以實(shí)現(xiàn)洗脫液的切換，并根據(jù)在切換洗脫液之后獲得的吸光度，對(duì)提取液控制開關(guān)進(jìn)行控制，以收集到目標(biāo)提取液體。在停止收集目標(biāo)提取液體的情況下，控制清洗開關(guān)打開，以使清洗液經(jīng)清洗液管道流入紫外檢測(cè)單元對(duì)紫外檢測(cè)單元進(jìn)行清洗。

? 實(shí)現(xiàn)目標(biāo)

一個(gè)在線紫外取樣檢測(cè)器實(shí)現(xiàn)兩根提取柱的取樣檢測(cè)并能自動(dòng)控制其洗脫液切換、提取液收集與排污切換，極大提高生產(chǎn)效率。

? 在線紫外檢測(cè)器與島津離線紫外檢測(cè)數(shù)據(jù)對(duì)比

大量現(xiàn)場(chǎng)吸光度測(cè)試數(shù)據(jù)從下圖對(duì)比可以看出，在線紫外數(shù)據(jù)測(cè)試穩(wěn)定可靠，偏差小；且在高吸光度值時(shí)無(wú)需稀釋直接檢測(cè)。

島津離線紫外檢測(cè)一般步驟：

1.聯(lián)機(jī)進(jìn)入測(cè)量掃描界面。

2.根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，設(shè)置檢測(cè)參數(shù)。

3.在樣品室內(nèi)參比及檢測(cè)光路同時(shí)放入裝有空白溶液的比色皿。

4. 點(diǎn)擊“基線測(cè)量"以扣除空白的背景吸收。

5. 人工取樣送至理化分析室，裝入比色皿（高濃度稀釋），將檢測(cè)光路中的空白溶液換成待測(cè)樣品，點(diǎn)擊“掃描"完成樣品掃描檢測(cè)。

6. 將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈，倒立晾干放回樣品室內(nèi)。

歐世盛在線紫外檢測(cè)一般步驟：

1.開機(jī)初始化，設(shè)備預(yù)熱。

2.切換閥自動(dòng)切換到清洗位，自動(dòng)沖洗，自動(dòng)校零。

3.樣品液泵入比色皿，實(shí)時(shí)顯示吸光度數(shù)值。

4. 廢液通過廢液蠕動(dòng)泵輸送到原裝置廢液管中。

5.測(cè)量結(jié)束切換閥調(diào)至清洗位，自動(dòng)沖洗。

? 核心優(yōu)勢(shì)對(duì)比

03總結(jié)

全自動(dòng)在線紫外檢測(cè)系統(tǒng)的核心優(yōu)勢(shì)在于將實(shí)驗(yàn)室能力“現(xiàn)場(chǎng)化"：通過免試劑、全自動(dòng)、秒級(jí)響應(yīng)的設(shè)計(jì)，解決了離線方法在實(shí)時(shí)性、人力成本和環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)上的瓶頸，尤其適用于需要高頻監(jiān)測(cè)的場(chǎng)景。